DnaJB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-404227

概要

DNAJB6は、Hsp70と協働して通常時およびストレス条件下でタンパク質のフォールディング、選別（トリアージ）、ならびにプロテオスタシスを制御するHsp40/DnaJ共シャペロンファミリーの一員であるDnaJB6をコードします。DnaJB6は、誤って折り畳まれたタンパク質の凝集を抑制することに関与し、細胞骨格の構築、シャペロン介在性の品質管理、そして細胞恒常性に影響するストレス応答性シグナル伝達にも寄与します。DNAJB6機能の破綻は、タンパク質凝集や筋病理を特徴とする疾患（肢帯型筋ジストロフィーを含む）と関連付けられており、神経変性に関連するプロテオトキシック・ストレスの文脈でも研究されています。これらの生物学的関連性から、DNAJB6は凝集、シャペロンネットワーク、誤折り畳みタンパク質に対する細胞のレジリエンスを司る経路を解明するための有用な結節点となります。

DnaJB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるDNAJB6遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、DNAJB6内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、DNAJB6のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DnaJB6タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DnaJB6シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、DNAJB6欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DnaJB6の機能に不可欠なDNAJB6エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、DNAJB6ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DnaJB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびDnaJB6 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、DNAJB6遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DnaJB6 HDRプラスミド（h）および DnaJB6 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDNAJB6ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDNAJB6標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。