DNA pol δ 4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-408268-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DNA pol δ 4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DNA pol δ 4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DNA pol δ 4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para POLD4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DNA pol δ 4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-408268-NIC | 20 µg | $410.00 |
POLD4 codifica a subunidade 4 da DNA polimerase delta, um componente acessório do holoenzima DNA polimerase δ que sustenta a replicação cromossómica do DNA com alta fidelidade e a síntese da cadeia retardada. Por meio de interações no replissoma, a polimerase δ coordena-se com a processividade dependente de PCNA, a maturação dos fragmentos de Okazaki e a síntese de reparo do DNA durante o reparo por excisão de bases e o reparo de incompatibilidades. O funcionamento adequado de POLD4 contribui para a estabilidade do genoma, a tolerância ao stress de replicação e a progressão correta do ciclo celular durante a fase S. A desregulação das subunidades da polimerase δ e de vias associadas à replicação é frequentemente analisada em estudos de mutagénese, instabilidade cromossómica e fenótipos de resposta ao dano no DNA associados ao cancro.
DNA pol δ 4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus POLD4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de POLD4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função POLD4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com POLD4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.