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DMRT1双切口酶质粒(h) | sc-402856-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DMRT1双切口酶质粒(h2) | sc-402856-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DMRT1 编码一种含 DM 结构域的转录因子,能够结合特定序列的 DNA 元件,从而调控性别决定与分化程序,并在支持细胞(Sertoli 细胞)和生殖细胞的发育中发挥重要作用。在人体组织中,它参与调控性腺命运、减数分裂以及维持睾丸特征的转录网络,通过协同调节下游发育相关基因来实现这些功能。DMRT1 的剂量改变或表达失衡与性发育异常(DSD)及精子发生受损相关,反映出其在性腺发生过程中对基因调控平衡的高度敏感性。由于它是界定谱系的关键调控因子,DMRT1 常被用于生殖发育、细胞命运决定与转录调控等模型研究。
DMRT1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 DMRT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对DMRT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏DMRT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了DMRT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。