Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Dia 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420000-KO-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Dia 1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Dia 1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Dia 1 Anticorpo (E-4): sc-373807
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Dia 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420000-KO-2 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Diaph1 (mDia1) codifica a formina Dia 1, um fator de nucleação e elongação de actina que coordena a montagem linear de F-actina a jusante de GTPases da família Rho, incluindo a RhoA. A Dia 1 sustenta processos de remodelação do citoesqueleto, como polarização celular, adesão, citocinese e migração direcionada, ao conectar sinais de sinalização à dinâmica de actina e à estabilização de microtúbulos. Por meio dessas funções, o Diaph1 é frequentemente estudado em vias que governam o tráfego de células imunes, o comportamento de barreiras vasculares e epiteliais e a mecanotransdução. Alterações na atividade de DIAPH1 têm sido associadas a fisiopatologia relacionada ao citoesqueleto, incluindo fenótipos plaquetários e hematológicos e perda auditiva neurossensorial progressiva, o que motiva estudos mecanísticos em sistemas murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Dia 1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Diaph1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Diaph1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Diaph1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Dia 1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Diaph1 para a investigação da sinalização de Dia 1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Diaph1 críticos para a função Dia 1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Diaph1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Dia 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Dia 1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Diaph1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Dia 1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Dia 1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Diaph1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Diaph1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.