Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
DGUOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407916
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DGUOK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DGUOK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DGUOK Anticorpo (H-3): sc-376267
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DGUOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407916 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
A desoxiguanosina quinase (DGUOK) é uma desoxirribonucleosídeo quinase mitocondrial que catalisa a fosforilação de desoxirribonucleosídeos de purina, sustentando o pool mitocondrial de desoxirribonucleotídeos necessário para a replicação e o reparo do mtDNA. Ela atua nas vias mitocondriais de salvamento de nucleotídeos e contribui para a manutenção do genoma, a capacidade de fosforilação oxidativa e a homeostase bioenergética celular. Alterações na atividade da DGUOK estão associadas a fenótipos de depleção do DNA mitocondrial e a disfunção mitocondrial, tornando-a relevante para estudos de doenças mitocondriais, síndromes hepatocerebrais e defeitos do metabolismo energético em células humanas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DGUOK (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DGUOK em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DGUOK, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DGUOK na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DGUOK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DGUOK para a investigação da sinalização de DGUOK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DGUOK críticos para a função DGUOK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DGUOK para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DGUOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DGUOK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DGUOK. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DGUOK Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DGUOK (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DGUOK para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DGUOK definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.