DGCR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419995

概要

Dgcr2 はDGCR2をコードしており、DGCR2は発生中の神経組織に豊富に発現する膜貫通タンパク質で、神経細胞の分化、移動、回路形成を支える過程に関与すると考えられています。DGCR2は22q11.2のシンテニー領域に位置し、神経発達表現型やシナプス機能に影響を与えるコピー数変異（CNV）との関連で研究されています。マウスモデルでは、Dgcr2の改変を通じて、細胞間シグナル伝達の変化や膜関連スキャフォールディングの変化が脳の発生過程にどのように寄与するかを検討します。これらの特性により、DGCR2は神経発達の脆弱性をもたらす経路の機序解明や、神経結合性のシステムレベルの変化を扱う研究において重要な対象となります。

DGCR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるDgcr2遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Dgcr2内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Dgcr2のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、DGCR2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、DGCR2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Dgcr2欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• DGCR2の機能に不可欠なDgcr2エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Dgcr2ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• DGCR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびDGCR2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Dgcr2遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  DGCR2 HDRプラスミド（m）および DGCR2 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはDgcr2ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のDgcr2標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。