Dexras2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (r): sc-437366

概要

Dexras2（RASD2）は、神経組織に豊富に発現するRas関連の小型GTP結合タンパク質で、Gタンパク質共役受容体（GPCR）および神経型一酸化窒素合成酵素（nNOS）経路の下流でシグナル伝達のスイッチとして機能します。アデニル酸シクラーゼおよび下流のキナーゼカスケードを調節することで、受容体刺激をサイクリックヌクレオチドシグナル、カルシウム依存性応答、シナプス可塑性の変化に結び付ける役割を担います。ラットの系では、Dexras2は概日リズムやドーパミン関連の神経シグナルを制御する機構の解析に用いられており、神経行動表現型やストレス応答性回路との関連が示唆されています。Dexras2のようなRASファミリーのシグナル伝達ノードの機能破綻は、中枢神経系（CNS）の機能障害に関与する異常なシグナル伝達、神経興奮性、経路間クロストークを研究する上で広く有用な情報を提供します。

Dexras2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）は、rat細胞株における遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Dexras2タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Dexras2シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Dexras2の機能に不可欠なエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Dexras2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r）およびDexras2 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（r2）によってコードされるgRNAは、遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Dexras2 HDRプラスミド（r）および Dexras2 HDRプラスミド（r2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定の標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。