Delta-3 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420011

개요

Dll3는 배아 발달 과정에서 Notch 수용체 신호전달을 조절하는 비전형적 Notch 리간드인 Delta-3를 암호화하며, 특히 체절형성(somitogenesis)과 전후축(anterior–posterior) 패터닝에서 중요한 역할을 합니다. 마우스에서 DLL3는 주로 골지체와 소포체 내에서 기능하면서 수용체의 처리 과정과 리간드 상호작용에 영향을 주어 Notch 경로의 출력 신호를 조절하고, 세포 운명 결정에 관여하는 전사 프로그램을 형성합니다. Dll3에 이상이 생기면 진동성 Notch 신호와 분절 시계(segmentation clock)의 동역학이 교란되어 척추와 늑골 패터닝 결함이 나타나며, 선천성 척추 기형을 설명하는 모델이 됩니다. 또한 Notch 신호는 분화, 증식, 조직 항상성과도 교차하므로, Dll3 기능상실(loss-of-function) 연구는 발달 및 질병 관련 맥락에서 경로 간 상호작용(crosstalk)을 규명하는 데 유용합니다.

Delta-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Dll3 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Dll3 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Dll3의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Delta-3 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Delta-3 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Dll3 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Delta-3 기능에 중요한 Dll3 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Dll3 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Delta-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Delta-3 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Dll3 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Delta-3 HDR 플라스미드 (m) 및 Delta-3 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Dll3 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Dll3 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.