非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DDX33 抗体 (B-4): sc-390573. IMR-32 (A), NIH/3T3 (B) 和 F9 (C) 全细胞裂解液中 DDX33 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
DDX33双切口酶质粒(m): sc-432143-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- DDX33 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- DDX33双切酶质粒（m）和DDX33双切酶质粒（m2）编码针对Dhx33的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：DDX33: sc-390573，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
DDX33双切口酶质粒(m) | sc-432143-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX33双切口酶质粒(m2) | sc-432143-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Dhx33 编码 DDX33，这是一种 DEAD-box RNA 解旋酶，参与对支持 RNA 代谢与翻译的 RNA–蛋白复合物进行 ATP 依赖性的重塑。DDX33 与核糖体生物发生及核仁功能有关，可在细胞生长与应激适应过程中影响 rRNA 加工以及蛋白质合成能力。通过这些作用，DDX33 与调控细胞增殖和先天免疫信号输出的通路相交汇，而这些通路依赖受调控的 RNA 加工。RNA 解旋酶功能失调与肿瘤发生程序及炎症表型广泛相关，因此 Dhx33 是用于研究以 RNA 为中心的细胞状态调控机制的一个有价值节点。
DDX33 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Dhx33 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Dhx33内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Dhx33的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Dhx33基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。