DDX21 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405770-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX21O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDX21 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DDX21 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DDX21. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDX21 Anticorpo (D-8): sc-376953
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX21 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405770-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DDX21 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405770-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DDX21 codifica uma helicase de RNA do tipo DEAD-box localizada no nucléolo, que coordena a transcrição e o processamento de rRNA, a biogênese de ribossomos e a organização nucleolar de ordem superior. Por meio da remodelação dependente de ATP de complexos RNA–proteína, DDX21 contribui para a transcrição de rDNA conduzida pela RNA polimerase I, a maturação do pré‑rRNA e o acoplamento da produção de ribossomos aos programas celulares de crescimento. DDX21 também tem sido implicada na regulação da tradução de mRNA e na sinalização imune inata, por meio de interações com espécies de RNA e complexos ribonucleoproteicos. A desregulação da função nucleolar e das vias de biogênese de ribossomos associadas à DDX21 está relacionada a respostas de estresse proliferativo e a programas de expressão gênica alterados observados em múltiplos contextos de doença.
DDX21 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DDX21 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DDX21. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DDX21. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DDX21 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.