Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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DDX11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418103
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDX11 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico DDX11, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDX11 Anticorpo (D-2): sc-271711
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDX11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418103 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
DDX11 (helicase DEAD/H-box 11), também conhecida como ChlR1, é uma helicase de DNA que sustenta a estabilidade do genoma ao promover a coesão entre cromátides-irmãs e a replicação eficiente do DNA. Ela participa do reparo de DNA acoplado à replicação e da progressão da forquilha de replicação, conectando-se ao estabelecimento da coesão e a vias mais amplas de resposta a danos no DNA. A atividade de DDX11 ajuda a prevenir quebras cromossômicas e aneuploidia associadas ao estresse replicativo, vinculando sua função a mecanismos que protegem a segregação cromossômica. A interrupção genética ou disfunção de DDX11 está associada a fenótipos de instabilidade genômica relacionados à coesina, incluindo a síndrome de quebra de Varsóvia, tornando-a relevante para o estudo de defeitos de coesão e de danos ao DNA associados à replicação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DDX11 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DDX11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DDX11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DDX11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DDX11.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DDX11 para a investigação da sinalização de DDX11, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DDX11 críticos para a função DDX11
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DDX11 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo DDX11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DDX11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DDX11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo DDX11 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DDX11 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DDX11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DDX11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.