DDRGK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-413090

Visão geral

DDRGK1 (DDRGK domain containing 1; também conhecido como UFBP1) é um componente essencial do sistema de conjugação de UFM1, que sustenta a homeostase do retículo endoplasmático (RE) e o controle de qualidade de proteínas. A proteína participa da UFMilação no RE, conectando processos associados aos ribossomos e a degradação associada ao RE à adaptação ao estresse celular, incluindo a resposta a proteínas mal dobradas. Por meio dessas vias, DDRGK1 influencia a proteostase, a sobrevivência celular sob estresse do RE e a coordenação do manejo de proteínas secretórias. A desregulação de fatores da via de UFM1, incluindo DDRGK1, tem sido associada à vulnerabilidade celular em contextos como disfunção hematopoética e a biologia de doenças relacionadas ao estresse, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO DDRGK1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene DDRGK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do DDRGK1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do DDRGK1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína DDRGK1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de DDRGK1 para a investigação da sinalização de DDRGK1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) DDRGK1 críticos para a função DDRGK1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos DDRGK1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo DDRGK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo DDRGK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus DDRGK1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo DDRGK1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR DDRGK1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia DDRGK1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo DDRGK1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.