Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO DDI2 (m): sc-427193
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- DDI2 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique DDI2, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: DDI2 Antibody (A-3): sc-514004
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO DDI2 (m) | sc-427193 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
La DDI2 murine (DNA damage-inducible 1 homolog 2) code une protéase aspartyl impliquée dans le contrôle qualité des protéines et la signalisation de la réponse au stress, avec des rôles rapportés dans le traitement et la régulation de programmes transcriptionnels liés à la fonction du protéasome. L’activité de DDI2 est liée à la dynamique du système ubiquitine–protéasome et à l’adaptation cellulaire au stress protéotoxique, en influençant l’élimination des protéines mal repliées ou endommagées. Par ces processus, DDI2 peut moduler des voies contrôlant la progression du cycle cellulaire, l’apoptose et la stabilité du génome en conditions de stress. La dérégulation de la protéostasie et de la signalisation de stress est pertinente pour des mécanismes étudiés dans la neurodégénérescence, l’inflammation et la biologie du cancer, ce qui fait de Ddi2 un locus utile pour la dissection des voies dans des modèles murins.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO DDI2 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Ddi2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Ddi2, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Ddi2 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine DDI2.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Ddi2 pour l'étude de la signalisation de DDI2, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Ddi2 essentiels à la fonction de DDI2
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Ddi2 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le DDI2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le DDI2 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Ddi2. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le DDI2 plasmide HDR (m) et le DDI2 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Ddi2 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Ddi2 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.