DDC Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419967-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DDCO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DDC (m) e o Plasmídeo Double Nickase DDC (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ddc. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DDC Anticorpo (8E8): sc-293287
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DDC Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419967-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Ddc de camundongo codifica a descarboxilase de L-aminoácidos aromáticos (DDC), uma enzima dependente de fosfato de piridoxal que converte L-DOPA em dopamina e 5-hidroxitriptofano em serotonina, situando-se em um ponto-chave da biossíntese dos neurotransmissores catecolaminérgicos e indolaminérgicos. A atividade da DDC sustenta a neurotransmissão monoaminérgica e a sinalização neuromoduladora que influenciam o desenvolvimento neuronal, a plasticidade sináptica e a regulação neuroendócrina. Nos sistemas nervosos central e periférico, a expressão de Ddc contribui para o fluxo metabólico nas vias de dopamina e serotonina, com efeitos a jusante sobre o transporte vesicular, a sinalização por receptores e o equilíbrio do estresse oxidativo. Alterações na função da DDC ou na disponibilidade de monoaminas são relevantes para modelos experimentais de fenótipos motores e afetivos e para estudos de processos neurodesenvolvimentais e neurodegenerativos dependentes de neurotransmissores.
DDC O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ddc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ddc. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ddc. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ddc interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.