Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
DAGLα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402826-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DAGLαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DAGLα (h) e o Plasmídeo Double Nickase DAGLα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DAGLA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:DAGLα Anticorpo (E-6): sc-390409
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DAGLα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402826-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DAGLα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402826-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DAGLA codifica a lipase de diacilglicerol alfa (DAGLα), uma hidrolase de serina associada à membrana que catalisa a formação do endocanabinoide 2-araquidonoilglicerol (2-AG) a partir de diacilglicerol. Ao controlar a disponibilidade de 2-AG, a DAGLα regula a sinalização dos recetores canabinoides e a plasticidade sináptica, ligando o metabolismo de fosfolípidos a redes de sinalização neuromodulatória. A atividade da DAGLα interage com vias de segundos mensageiros lipídicos, incluindo o turnover de diacilglicerol dependente de PLC e o equilíbrio a jusante entre eicosanoides e endocanabinoides. A desregulação da sinalização endocanabinoide e da homeostase lipídica envolvendo DAGLA tem sido investigada no contexto de fenótipos do neurodesenvolvimento e neuropsiquiátricos, bem como em aspetos mais amplos da biologia metabólica e inflamatória.
DAGLα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DAGLA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DAGLA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DAGLA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DAGLA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.