DAD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404172-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- DAD1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase DAD1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase DAD1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DAD1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
DAD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404172-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
DAD1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404172-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DAD1 (defensor contra a morte apoptótica 1) codifica uma subunidade conservada do complexo oligosacariltransferase (OST) no retículo endoplasmático, apoiando a glicosilação ligada a N durante o processamento co-traducional de proteínas. Ao acoplar a transferência de glicanos a polipeptídeos nascentes, DAD1 influencia o controlo de qualidade do dobramento proteico, a homeostase do RE e a sinalização dependente da proteostase. A disrupção da função de DAD1 pode sensibilizar as células à apoptose associada ao stress do RE e alterar a maturação e o tráfego de proteínas secretadas e de membrana. Estas propriedades fazem de DAD1 um nó útil para estudar a biogénese de glicoproteínas, as vias da resposta a proteínas mal dobradas e mecanismos de proteostase relevantes para doenças.
DAD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DAD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DAD1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DAD1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DAD1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.