D3DR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402172-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- D3DRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase D3DR (h) e o Plasmídeo Double Nickase D3DR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DRD3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:D3DR Anticorpo (9F4): sc-136170
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
D3DR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402172-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
D3DR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402172-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O DRD3 codifica o receptor de dopamina D3 (D3DR), um GPCR acoplado a Gi/o que modula a atividade da adenilato ciclase, reduz o cAMP intracelular e influencia, a jusante, a sinalização mediada por PKA, a condutância de canais iônicos e as respostas da via MAPK. O D3DR participa da neurotransmissão dopaminérgica e do crosstalk entre receptores que molda a plasticidade sináptica, a excitabilidade neuronal e a sinalização neuroendócrina. Alterações na expressão ou na sinalização de DRD3 têm sido associadas a mecanismos de doenças neuropsiquiátricas e neurodegenerativas, incluindo desregulação do processamento de recompensa, da cognição e do controle motor. Como receptor de superfície celular com saídas de sinalização farmacologicamente exploráveis, o DRD3 é amplamente estudado para mapeamento de vias, tráfego de receptores e viés de sinalização em modelos celulares humanos.
D3DR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DRD3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DRD3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DRD3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DRD3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.