Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Cytokeratin 8 Antibody (C51) Alexa Fluor® 594: sc-8020 AF594. Direct fluorescent western blot analysis of Cytokeratin 8 expression in JAR (A), MCF7 (B), SK-BR-3 (C), BT-20 (D), PC-3 (E) and Hep G2 (F) whole cell lysates. Blocked with UltraCruz® Blocking Reagent: sc-516214.
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Cytokeratin 8双切口酶质粒(h): sc-418254-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Cytokeratin 8 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Cytokeratin 8双切酶质粒（h）和Cytokeratin 8双切酶质粒（h2）编码针对KRT8的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Cytokeratin 8: sc-8020，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Cytokeratin 8双切口酶质粒(h) | sc-418254-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cytokeratin 8双切口酶质粒(h2) | sc-418254-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KRT8 编码细胞角蛋白 8（cytokeratin 8），这是一种 II 型中间丝蛋白，主要与 KRT18 形成异源聚合体，在单层上皮细胞中构建核心细胞骨架网络。细胞角蛋白 8 维持细胞结构与力学韧性并参与细胞器定位；同时，它还通过依赖磷酸化的丝状结构重塑参与细胞极性、有丝分裂进程、凋亡信号传导以及应激反应等过程。KRT8 表达水平或丝状结构组织的改变与上皮完整性缺陷有关，并且常在上皮肿瘤生物学、侵袭以及与转移相关的表型研究中被重点关注。作为常用的上皮标志物，细胞角蛋白 8 也有助于在发育与组织稳态的模型体系中界定谱系状态与分化程序。
Cytokeratin 8 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 KRT8 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对KRT8内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏KRT8的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了KRT8基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。