Cytokeratin 19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-400281

概要

KRT19はサイトケラチン19（CK19）をコードしており、CK19はI型の中間径フィラメントタンパク質として、II型ケラチンと対を成して上皮細胞内のケラチン細胞骨格を形成します。CK19は構造的完全性とメカノトランスダクション（機械刺激の情報伝達）を支え、デスモソームおよびヘミデスモソーム複合体との相互作用を通じて、細胞極性、接着の動態、ストレス応答に寄与します。KRT19の発現変化は上皮の分化状態や、創傷修復や上皮間葉転換（EMT）などのリモデリングプログラムと関連し、増殖・遊走・細胞可塑性の変化と結びつきます。がん研究においては、CK19は上皮系譜マーカーとして広く用いられ、腫瘍の進展や転移に関連する表現型の解析で頻繁に検討されています。

Cytokeratin 19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKRT19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KRT19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KRT19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Cytokeratin 19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Cytokeratin 19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KRT19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Cytokeratin 19の機能に不可欠なKRT19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KRT19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Cytokeratin 19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびCytokeratin 19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KRT19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Cytokeratin 19 HDRプラスミド（h）および Cytokeratin 19 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKRT19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKRT19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。