非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
细胞色素 b5 抗体 (36): sc-130311. 人肝脏组织提取物中细胞色素 b5 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
cytochrome b5双切口酶质粒(h): sc-405811-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- cytochrome b5 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- cytochrome b5双切酶质粒（h）和cytochrome b5双切酶质粒（h2）编码针对CYB5A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：cytochrome b5: sc-130311，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
cytochrome b5双切口酶质粒(h) | sc-405811-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cytochrome b5双切口酶质粒(h2) | sc-405811-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 CYB5A 基因编码细胞色素 b5，这是一种膜锚定型含血红素蛋白，负责将电子从 NADH–细胞色素 b5 还原酶传递给内质网及线粒体外膜上的多种氧化酶。它支持多条关键脂质代谢通路，包括脂肪酸去饱和与延长、胆固醇和类固醇生物合成，以及通过调控细胞色素 P450 催化循环介导的外源性化合物氧化。通过影响氧化还原平衡与代谢通量，CYB5A 在氧化代谢活跃的肝细胞与类固醇生成组织中有助于维持细胞稳态。CYB5A 依赖的电子传递一旦受到扰动，已被关联到药物代谢改变和类固醇生成缺陷，因此它是研究代谢失衡与氧化还原敏感信号传导的一个有用节点。
cytochrome b5 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CYB5A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYB5A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CYB5A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CYB5A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。