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Cyp4f15慢病毒激活颗粒(m) | sc-430669-LAC | 200 µl | $455.00 |
Cyp4f15 编码一种小鼠细胞色素 P450 单加氧酶,属于 CYP4F 家族,能够催化脂肪酸和脂质介质的 ω-羟化反应。通过调控二十碳烷酸类(eicosanoids)及相关信号脂质的周转,CYP4F 酶影响炎症信号传导、氧化代谢以及脂质稳态等通路。CYP4F 活性发生改变会改变局部生物活性脂质的浓度,使这一酶促轴与免疫调控、肝脏与肠道代谢以及组织应激反应等研究相关联。因此,Cyp4f15 可作为在小鼠模型中解析脂质介质网络及对外源化合物有反应的代谢程序的一个有用节点。
Cyp4f15 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Cyp4f15 表达。
Cyp4f15 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Cyp4f15转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Cyp4f15表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Cyp4f15 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。