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CYP2J2双切口酶质粒(h) | sc-402955-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CYP2J2双切口酶质粒(h2) | sc-402955-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYP2J2 编码一种人源细胞色素 P450 环氧化酶,可氧化内源性脂质,包括将花生四烯酸转化为环氧二十碳三烯酸(EETs)。EETs 是具有生物活性的介质,能够影响血管张力、炎症信号传导以及细胞应激反应。通过微粒体单加氧酶活性,CYP2J2 与类花生酸代谢和氧化还原稳态通路发生交叉,从而调控内皮功能与平滑肌生物学。CYP2J2 表达或活性的改变已在心脏代谢性状、炎症状态以及肿瘤细胞表型等背景下被研究,这也反映了其在脂质介质平衡与细胞信号调控中的作用。作为一种外源物代谢酶,CYP2J2 也参与部分化合物的氧化生物转化,因此与药理学和毒理学研究相关。
CYP2J2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CYP2J2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYP2J2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CYP2J2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CYP2J2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。