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cylindromatosis 1双切口酶质粒(h) | sc-400882-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cylindromatosis 1双切口酶质粒(h2) | sc-400882-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CYLD 编码 cylindromatosis 1(圆柱瘤蛋白 1),是一种去泛素化酶,优先从信号传导中间体上移除 Lys63 连接型以及线性(Met1)连接型多聚泛素链。通过调控依赖泛素的信号传递,CYLD 调节 NF-κB 和 MAPK 通路的输出,影响先天免疫信号,并限制促进细胞存活和炎症相关的转录程序。CYLD 的活性还通过精细调节关键衔接蛋白与激酶复合物的泛素化水平,参与细胞周期控制、DNA 损伤应答以及细胞骨架动态等过程。CYLD 的遗传或功能性破坏与炎症信号失衡及肿瘤易感综合征相关,因此它是研究泛素信号与疾病相关通路生物学的重要节点之一。
cylindromatosis 1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CYLD 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CYLD内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CYLD的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CYLD基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。