Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
cyclin D2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401236-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- cyclin D2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase cyclin D2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase cyclin D2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CCND2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:cyclin D2 Anticorpo (B-6): sc-376676
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
cyclin D2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401236-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
cyclin D2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401236-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CCND2 codifica a ciclina D2, um parceiro regulador de CDK4/6 que impulsiona a progressão da fase G1 ao promover a fosforilação da proteína do retinoblastoma e a transcrição dependente de E2F. A ciclina D2 integra sinais mitogênicos de vias como PI3K–AKT e RAS–MAPK para coordenar a entrada no ciclo celular, a proliferação e programas de diferenciação dependentes do contexto. Alterações na dose ou no controle de CCND2 podem perturbar os checkpoints de G1/S, influenciando a estabilidade do genoma e a capacidade proliferativa. A desregulação da sinalização da ciclina D2 tem sido associada a fenótipos de crescimento aberrantes e é estudada em biologia do câncer, transtornos do desenvolvimento e modelos de linhagens endócrinas e neurais, nos quais o controle do eixo CDK4/6–RB é crítico.
cyclin D2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CCND2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CCND2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CCND2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CCND2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.