Plasmide Double Nickase (m) CX3CR1: sc-419886-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) CX3CR1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide CX3CR1 Double Nickase (m) et le plasmide CX3CR1 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Cx3cr1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) CX3CR1 | sc-419886-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) CX3CR1 | sc-419886-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cx3cr1 code le récepteur de chimiokine CX3CR1, un récepteur couplé aux protéines G qui se lie à la CX3CL1 (fractalkine) sous forme membranaire ancrée et sous forme soluble afin de réguler l’adhésion des leucocytes, la chimiotaxie et la survie cellulaire. Chez la souris, CX3CR1 est fortement exprimé dans les monocytes/macrophages, les cellules dendritiques et la microglie, contribuant à la surveillance immunitaire, au recrutement inflammatoire et à la communication neurone–glie. La signalisation via CX3CR1 module des voies telles que le flux de calcium médié par les GPCR, PI3K/AKT et MAPK, influençant la production de cytokines et les réponses phagocytaires. Une activité altérée de CX3CR1 a été impliquée dans la neuroinflammation et le remodelage synaptique, ainsi que dans l’inflammation cardiovasculaire et métabolique, ce qui étaye son utilisation dans des modèles de lésion tissulaire et dans l’étude des mécanismes des maladies inflammatoires chroniques.
CX3CR1 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Cx3cr1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Cx3cr1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Cx3cr1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Cx3cr1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.