CUZD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407311

Visão geral

CUZD1 (domínios do tipo CUB e zona pelúcida 1) codifica uma proteína secretada e associada à membrana, implicada na diferenciação de células epiteliais e na homeostase de tecidos secretórios. O CUZD1 participa de processos ligados ao tráfego de proteínas e à secreção regulada e tem sido associado a programas transcricionais a jusante da sinalização por citocinas, incluindo vias relacionadas à atividade de JAK/STAT em epitélios glandulares. Alterações na expressão de CUZD1 foram relatadas em neoplasias derivadas de epitélio e em estados inflamatórios, sustentando seu uso como um nó molecular para estudar transições de estado celular, respostas ao estresse e fenótipos associados a tumores. Em sistemas modelo humanos, o CUZD1 fornece um alvo acessível para dissecar mecanismos de remodelamento epitelial e resultados de sinalização dependentes do contexto.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CUZD1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CUZD1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CUZD1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CUZD1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CUZD1.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CUZD1 para a investigação da sinalização de CUZD1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CUZD1 críticos para a função CUZD1
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CUZD1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo CUZD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo CUZD1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CUZD1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo CUZD1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR CUZD1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CUZD1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CUZD1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.