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CtBP2双切口酶质粒(h) | sc-401865-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CtBP2双切口酶质粒(h2) | sc-401865-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 **CTBP2** 基因编码 C 端结合蛋白 2(CtBP2)。CtBP2 是一种对 NADH 敏感的转录共调节因子,主要作为共抑制子发挥作用:它将包括 HDAC 在内的染色质修饰复合物及其他表观遗传调控因子募集到序列特异性的转录因子上。CtBP2 影响调控细胞增殖、谱系决定、上皮–间质转化(EMT)和凋亡的基因程序,从而把细胞代谢状态与转录输出联系起来。通过这些作用,CtBP2 调控 Wnt/β-连环蛋白、TGF-β 以及与缺氧相关的转录网络等通路,并有助于塑造染色质可及性和增强子活性。CTBP2 的表达或功能失调与分化异常及肿瘤相关的转录状态有关,因此它是研究转录抑制机制以及代谢对基因调控影响的一个有用靶点。
CtBP2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CTBP2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CTBP2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CTBP2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CTBP2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。