Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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CRP Double Nickaseプラスミド (h): sc-401767-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- CRP Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- CRPダブルニカースプラスミド（h）およびCRPダブルニカースプラスミド（h2）は、CRPを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: CRP 抗体 (26D7): sc-69770
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
CRP Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401767-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRP Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401767-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
C反応性タンパク質（CRP）はペントラキシンファミリーに属するパターン認識分子で、主に肝細胞が炎症性サイトカイン、特にIL-6に応答して産生し、主要な急性期反応タンパク質として血中を循環する。CRPは損傷細胞や微生物表面上のホスホコリンなどのリガンドに結合し、オプソニン化を促進するとともに、C1qを介して古典経路補体カスケードを活性化する。これらの自然免疫過程を通じて、CRPは炎症シグナルを補体依存的なクリアランスと統合し、さらに骨髄系細胞上のFcγ受容体との相互作用を調節する。CRPの遺伝的多型や発現制御の破綻は、全身性炎症や心代謝関連、自己免疫関連の表現型との関連で広く研究されており、炎症生物学における重要な分子指標であると同時に調節因子でもある。
CRP ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における CRP 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、CRP内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、CRPの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、CRPが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。