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CRF-BP双切口酶质粒(h) | sc-403849-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CRF-BP双切口酶质粒(h2) | sc-403849-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CRHBP 编码促肾上腺皮质激素释放因子结合蛋白(CRF-BP),这是一种分泌型糖蛋白,可与 CRH 及其相关的尿皮质素(urocortins)结合,从而在下丘脑–垂体–肾上腺(HPA)轴中调控配体的生物可利用性及其与受体的相互作用。通过缓冲游离的 CRH 家族肽,CRF-BP 调节下游 CRHR1/CRHR2 信号通路,这些通路汇聚于 cAMP/PKA 以及控制应激反应性、神经内分泌分泌与炎症水平的转录程序。CRHBP 在脑和外周组织中均有显著表达,可影响神经–免疫通讯与内分泌稳态。CRH–尿皮质素信号及 CRHBP 表达模式的失调与应激相关的神经精神表型、代谢调控改变及炎症过程有关,因此对研究应激回路机制及外周 CRF 生物学具有重要意义。
CRF-BP 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CRHBP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CRHBP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CRHBP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CRHBP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。