Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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creatine kinase-M Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401132-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- creatine kinase-MO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase creatine kinase-M (h) e o Plasmídeo Double Nickase creatine kinase-M (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CKM. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:creatine kinase-M Anticorpo (G-9): sc-365046
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
creatine kinase-M Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401132-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
creatine kinase-M Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401132-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CKM codifica a creatina quinase do tipo muscular (creatina quinase M), uma fosfotransferase citosólica que catalisa a transferência reversível de fosfato entre ATP e creatina, atuando como tampão e regenerando rapidamente o ATP durante flutuações na demanda energética. Essa reação é central para o sistema de transporte por fosfocreatina (phosphocreatine shuttle) e conecta a glicólise e a fosforilação oxidativa ao consumo de ATP pelas miofibrilas, sustentando a contração muscular e a homeostase energética celular de forma mais ampla. A atividade de CKM contribui para o metabolismo de creatina/fosfagênios e é comumente usada como marcador bioquímico e molecular em estudos de diferenciação do músculo esquelético, respostas ao estresse e função mitocondrial. A desregulação da sinalização da creatina quinase e alterações na expressão de CKM têm sido associadas a dano muscular e perturbações metabólicas, tornando-a relevante para investigações mecanísticas de miopatias e fenótipos relacionados a déficit energético.
creatine kinase-M O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CKM em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CKM. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CKM. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CKM interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.