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connexin 26慢病毒激活颗粒(h) | sc-402132-LAC | 200 µl | $455.00 |
GJB2 编码连接蛋白 26(connexin 26),这是一种缝隙连接通道蛋白,可组装成连接子(connexon),介导细胞间离子和小分子代谢物的直接交换,从而支持电耦联和代谢耦联。连接蛋白 26 通过在上皮和感觉组织中协调信号传导来维持组织稳态,并影响细胞分化、应激反应以及屏障功能。GJB2 表达异常或连接蛋白 26 通道功能改变与遗传性听力损失及其他上皮生理障碍密切相关,因此它是耳蜗生物学与缝隙连接通讯研究模型中常用的靶点。在科研中,连接蛋白 26 也提供了一个易于操作的切入点,用于研究缝隙连接动力学、细胞连通性以及连接相关蛋白的转录调控。
connexin 26 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 GJB2 表达。
connexin 26 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在GJB2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性connexin 26表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 GJB2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。