COL6A2 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-403209

개요

COL6A2는 콜라겐 VI의 α2 사슬을 암호화하며, 콜라겐 VI는 세포외기질(ECM)의 미세섬유성 구성 요소로서 COL6A1 및 COL6A3와 함께 조립되어 결합조직에서 염주 모양의 섬유(beaded filaments)를 형성합니다. 콜라겐 VI는 ECM의 조직화, 세포–기질 부착, 기계신호전달(mechanotransduction)에 기여하며, 세포골격 구조와 integrin/FAK, MAPK, TGF-β 관련 리모델링 프로그램과 같은 신호전달 경로에 영향을 줍니다. 이러한 과정을 통해 COL6A2는 섬유아세포, 근육세포 및 기타 기질성(stromal) 세포 유형에서 조직의 완전성과 세포 스트레스 반응 조절에 관여합니다. 콜라겐 VI 조립이 병적으로 교란되면 유전성 신경근육 및 결합조직 질환과 연관되므로, COL6A2는 ECM에 의해 유도되는 표현형을 모델링하는 데 관련성 높은 표적입니다.

COL6A2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 COL6A2 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 COL6A2 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 COL6A2의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 COL6A2 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 COL6A2 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 COL6A2 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• COL6A2 기능에 중요한 COL6A2 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 COL6A2 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• COL6A2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 COL6A2 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 COL6A2 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  COL6A2 HDR 플라스미드 (h) 및 COL6A2 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 COL6A2 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 COL6A2 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.