COL2A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400359-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- COL2A1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase COL2A1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase COL2A1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para COL2A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:COL2A1 Anticorpo (M2139): sc-52658
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
COL2A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400359-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
COL2A1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400359-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
COL2A1 codifica a cadeia α1 do colágeno tipo II, um colágeno fibrilar importante na cartilagem hialina e na coluna vertebral em desenvolvimento. A montagem da sua matriz extracelular sustenta a diferenciação dos condrócitos, a biomecânica tecidual e a fibrilogénese do colágeno, integrando-se com redes ricas em proteoglicanos para manter a integridade da cartilagem. A expressão e o processamento de COL2A1 intersetam-se com vias de remodelação da matriz, incluindo a regulação por programas condrogénicos conduzidos por SOX9 e o feedback da sinalização da família TGF-β. Variações genéticas ou disfunção desregulada de COL2A1 estão associadas a displasias esqueléticas hereditárias e à degeneração da cartilagem relevante para a osteoartrite, tornando-o um alvo comum na investigação em biologia musculoesquelética e da matriz extracelular.
COL2A1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus COL2A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de COL2A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função COL2A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com COL2A1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.