Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
ClpP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424769
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ClpP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ClpP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ClpP Anticorpo (B-12): sc-271284
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ClpP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424769 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Clpp codifica a subunidade proteolítica mitocondrial da peptidase caseinolítica dependente de ATP ClpP, uma protease de serina que atua em parceria com a desenovelase ClpX para remover proteínas danificadas ou mal dobradas e manter a proteostase na matriz. Esse eixo de controle de qualidade sustenta a capacidade de fosforilação oxidativa, limita o estresse proteotóxico e oxidativo e influencia a sinalização da resposta mitocondrial a proteínas mal dobradas (mtUPR). A atividade de ClpP se conecta a vias que regulam o metabolismo energético, a biogênese mitocondrial e programas transcricionais adaptativos ao estresse. A desregulação da função de CLPP tem sido associada a fenótipos de disfunção mitocondrial e é comumente investigada em modelos de neurodegeneração, doença metabólica e reprogramação mitocondrial associada ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ClpP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Clpp em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Clpp, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Clpp na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ClpP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Clpp para a investigação da sinalização de ClpP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Clpp críticos para a função ClpP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Clpp para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ClpP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo ClpP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Clpp. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ClpP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR ClpP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Clpp para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Clpp definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.