CLK1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-419688

개요

Clk1은 CDC-like kinase 1(CLK1)을 암호화하며, CLK1은 세린/아르기닌-풍부(SR) 스플라이싱 인자를 인산화하고 스플라이소좀의 동역학을 조절하는 데 도움을 주는 이중 특이성 단백질 키나아제입니다. CLK1은 대체 스플라이싱과 pre-mRNA 처리의 조절을 통해 세포 주기 진행, 분화, 스트레스 적응성 유전자 발현을 관장하는 전사 프로그램에 기여합니다. 또한 CLK1 활성은 세포 스트레스와 성장 신호에 반응하는 경로를 포함해 RNA 처리를 미세 조정하는 신호 네트워크와 교차하며, 그 결과 단백질체의 다양성에 영향을 미칩니다. CLK 계열 키나아제 활성의 이상 조절과 비정상적인 스플라이싱 패턴은 여러 질환 관련 표현형과 연관되어 있어, 마우스 Clk1은 발생 및 병리에서 RNA 처리의 기전을 연구하는 데 유용한 핵심 노드로 활용됩니다.

CLK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Clk1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Clk1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Clk1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 CLK1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 CLK1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Clk1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• CLK1 기능에 중요한 Clk1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Clk1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• CLK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 CLK1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Clk1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  CLK1 HDR 플라스미드 (m) 및 CLK1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Clk1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Clk1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.