CIRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419664
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CIRP O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico CIRP, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CIRP Anticorpo (1C9): sc-293325
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CIRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419664 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Cirbp codifica a proteína de ligação a RNA induzível pelo frio (CIRP), uma chaperona de RNA responsiva ao estresse que modula a estabilidade, o transporte e a tradução de mRNAs. Em células de camundongo, a CIRP é induzida por hipotermia, irradiação UV, hipóxia e estresse oxidativo, e contribui para a regulação gênica pós-transcricional em grânulos de estresse e complexos ribonucleoproteicos relacionados. As vias associadas à CIRP se intersectam com respostas celulares ao estresse, sinalização inflamatória e regulação circadiana e metabólica por meio do controle seletivo de transcritos-alvo. A atividade desregulada de CIRP tem sido associada a respostas imunes e de estresse tecidual alteradas, tornando o locus Cirbp útil para estudos mecanísticos em inflamação, neurobiologia e adaptação ao estresse relevante ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO CIRP (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cirbp em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cirbp, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cirbp na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína CIRP.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cirbp para a investigação da sinalização de CIRP, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cirbp críticos para a função CIRP
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cirbp para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo CIRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo CIRP Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cirbp. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo CIRP Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR CIRP (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cirbp para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cirbp definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.