Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ChoK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403793
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ChoK O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ChoK, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ChoK Anticorpo (B-8): sc-376489
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ChoK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403793 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CHKA codifica a colina quinase alfa (ChoK), a enzima limitante de velocidade que fosforila a colina em fosfocolina na via de Kennedy para a biossíntese de fosfatidilcolina. Ao controlar os níveis de fosfocolina e a produção de fosfolipídios de membrana, a ChoK conecta o metabolismo lipídico à progressão do ciclo celular, à biogênese de membranas e às redes de transdução de sinal que dependem de segundos mensageiros derivados da fosfatidilcolina. Alterações na atividade de CHKA têm sido associadas à reprogramação metabólica e a programas de proliferação desregulados observados em múltiplos contextos celulares relevantes para doenças, tornando-o um ponto útil para investigar a sinalização impulsionada por lipídios. Estudos de CHKA/ChoK frequentemente se cruzam com vias que regulam a dinâmica de membranas, respostas ao estresse e a sinalização oncogênica de fatores de crescimento.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ChoK (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CHKA em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CHKA, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CHKA na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ChoK.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CHKA para a investigação da sinalização de ChoK, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CHKA críticos para a função ChoK
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CHKA para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ChoK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ChoK Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CHKA. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ChoK Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ChoK (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CHKA para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CHKA definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.