CHMP4B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401802-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CHMP4BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CHMP4B (h) e o Plasmídeo Double Nickase CHMP4B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CHMP4B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CHMP4B Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401802-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CHMP4B Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401802-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHMP4B (proteína 4B do corpo multivesicular carregado) é um componente central do complexo ESCRT-III, que conduz eventos de remodelação de membranas necessários para a triagem endossomal e a biogénese de corpos multivesiculares. Ao polimerizar nas membranas e ao coordenar-se com a atividade ATPase de VPS4, a CHMP4B favorece o sequestro de cargas, a formação de vesículas intraluminais e as etapas finais da abscisão citocinética, ligando-a a vias que controlam a desregulação de recetores e a cisão de membranas. A função do ESCRT dependente de CHMP4B também contribui para a reparação da membrana plasmática e para aspetos da autofagia e da homeostase lisossomal através do tráfego endolisossomal. Perturbações genéticas de componentes do ESCRT-III, incluindo CHMP4B, estão associadas a defeitos na divisão celular e na proteostase e foram implicadas em contextos de doenças neurodegenerativas e oculares, bem como em sinalização alterada em redes endocíticas relevantes para o cancro.
CHMP4B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CHMP4B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CHMP4B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CHMP4B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CHMP4B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.