Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
Non dati CRISPR: l'immagine illustra la qualità degli anticorpi per la visualizzazione dei risultati degli esperimenti CRISPR.
ceruloplasmin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-401798
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ceruloplasmin Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ceruloplasmin, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ceruloplasmin Antibody (H-3): sc-365205
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ceruloplasmin Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-401798 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
CP codifica la ceruloplasmina, una ossidasi multicuprosa legante il rame che catalizza l’ossidazione del Fe²⁺ a Fe³⁺ per supportare il caricamento della transferrina e la distribuzione sistemica del ferro. È un componente chiave dell’omeostasi del rame e dell’attività ferroxidasica, collegando la secrezione epatica e il controllo redox extracellulare al traffico del ferro e alle risposte allo stress ossidativo. La funzione della ceruloplasmina interseca vie che regolano l’esportazione del ferro, l’equilibrio delle specie reattive dell’ossigeno e la segnalazione infiammatoria in tessuti ad alta richiesta metabolica. Un’attività di CP deregolata è associata ad alterazioni nella gestione del ferro e a fenotipi di danno ossidativo, rendendola un bersaglio utile per studiare meccanismi rilevanti per la neurodegenerazione, la fisiologia epatica e modelli di stress cellulare legati all’anemia.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ceruloplasmin (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene CP in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del CP insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto CP a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ceruloplasmin.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di CP per lo studio della segnalazione di ceruloplasmin, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni CP critici per la funzione di ceruloplasmin
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di CP per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ceruloplasmin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ceruloplasmin CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus CP. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ceruloplasmin Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ceruloplasmin (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia CP per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio CP definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.