Cdc7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419586

概要

Cdc7（cell division cycle 7）は、DNA複製開始の中核的制御因子であるDDK複合体の触媒サブユニットとして機能するセリン／スレオニンキナーゼをコードします。Cdc7はMCMヘリカーゼの構成要素をリン酸化し、複製起点の発火を促進するとともに、チェックポイント制御と連動してS期の進行を調整し、複製ストレス経路からのシグナルを統合します。ゲノム複製および複製フォークの安定性における役割を通じて、Cdc7活性は増殖組織における染色体の完全性と細胞周期動態に影響を及ぼします。Cdc7シグナルの破綻は、異常増殖やゲノム不安定性といった表現型と関連づけられており、がん生物学やDNA損傷応答研究で頻繁に検討されています。

Cdc7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCdc7遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cdc7内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cdc7のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、Cdc7タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、Cdc7シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cdc7欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• Cdc7の機能に不可欠なCdc7エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cdc7ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• Cdc7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCdc7 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cdc7遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  Cdc7 HDRプラスミド（m）および Cdc7 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCdc7ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCdc7標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。