Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Cdc25C Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400833-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Cdc25CO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Cdc25C (h) e o Plasmídeo Double Nickase Cdc25C (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CDC25C. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Cdc25C Anticorpo (H-6): sc-13138
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Cdc25C Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400833-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Cdc25C Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400833-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CDC25C codifica a Cdc25C, uma fosfatase de dupla especificidade que ativa o complexo CDK1–ciclina B ao remover fosfatos inibitórios, promovendo a transição G2/M e a entrada em mitose. Sua atividade é rigidamente controlada pela sinalização de checkpoints, incluindo as vias ATR/CHK1 e ligadas ao p53, que restringem a Cdc25C durante dano ao DNA e estresse de replicação para manter a integridade do genoma. A regulação alterada de CDC25C pode desorganizar o timing mitótico e contribuir para a instabilidade cromossômica, tornando-o relevante para estudos de desregulação oncogênica do ciclo celular. A Cdc25C também interage com o sequestro por 14-3-3 e com a localização dependente de fosforilação, oferecendo pontos de entrada mecanísticos para dissecar a adaptação ao checkpoint e o controle mitótico.
Cdc25C O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CDC25C em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CDC25C. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CDC25C. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CDC25C interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.