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CD59双切口酶质粒(h) | sc-417670-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD59双切口酶质粒(h2) | sc-417670-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CD59(protectin,保护素)是一种通过糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定在细胞膜上的补体调控蛋白,可抑制末端膜攻击复合体(C5b-9)在宿主细胞表面的组装。通过限制补体介导的细胞溶解并减少旁观者损伤,CD59有助于维持细胞表面的免疫稳态,并在血管、造血与上皮等组织区室中调控炎症信号传导。CD59表达或功能的改变与补体激活失衡相关,并可参与以溶血、神经炎症和组织损伤为特征的补体驱动性病理过程的疾病机制。作为一种广泛表达的细胞表面蛋白,CD59也常用于研究膜微域生物学、免疫逃逸,以及先天免疫与细胞存活程序之间的串扰。
CD59 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 CD59 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CD59内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏CD59的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了CD59基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。