CD47 Lentiviral Activation Particles (h): sc-400508-LAC

Humanes CD47 kodiert ein transmembranäres Protein der Immunglobulin-Superfamilie, das über seine Interaktion mit SIRPα auf myeloiden Zellen als zentrales „Selbst“-Erkennungssignal fungiert und dadurch Phagozytose sowie die angeborene Immunüberwachung moduliert. CD47 bindet zudem Thrombospondin‑1 und beeinflusst damit Zelladhäsion, Migration, die Stickstoffmonoxid(‑NO)-Signalübertragung sowie vaskuläre und inflammatorische Antworten. Über diese Rezeptor‑Ligand‑Interaktionen verknüpft CD47 zytoskelettale Umbauprozesse und Überlebenssignale mit der Gewebehomöostase. Eine fehlregulierte CD47-Expression wurde mit Tumor-Mechanismen der Immunflucht sowie veränderter Entzündungs- und Gefäßbiologie in Verbindung gebracht und ist daher für mechanistische Studien zur Immunregulation und zur Signalgebung im Mikromilieu relevant.

CD47 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) erfüllen diesen Bedarf, indem sie das vollständige Transkriptionsaktivierungssystem des Synergistic Activation Mediator (SAM) in transduktionsbereite, hoch-titrige lentivirale Partikel verpacken und so eine effiziente CD47-Hochregulation über ein breiteres Spektrum menschlicher Zelltypen ermöglichen.

CD47 Lentivirale Aktivierungspartikel (h) liefern alle funktionellen Komponenten des Synergistic Activation Mediator (SAM)-Systems über lentivirale Transduktion. Das System umfasst drei Partikelpräparate, die gemeinsam in Zielzellen transduziert werden: eines, das für katalytisch inaktives dCas9 (Mutationen D10A und N863A) kodiert, das mit der VP64-Transaktivierungsdomäne und einem Blasticidin-Resistenzgen fusioniert ist; eines, das für das MS2-p65-HSF1-Fusionsprotein mit einem Hygromycin-Resistenzgen kodiert; und eines, das für eine zielspezifische 20-nt-sgRNA kodiert, die an zwei MS2-RNA-Aptamere mit einem Puromycin-Resistenzgen fusioniert ist. Nach der lentiviralen Transduktion und der genomischen Integration der Expressionskassetten werden die SAM-Komponenten stabil exprimiert und lagern sich am Zielort innerhalb der proximalen Promotorregion stromaufwärts der CD47-Transkriptionsstartstelle an, wo VP64, p65 und HSF1 kooperativ wirken, um endogene Transkriptionsmaschinerie zu rekrutieren und eine anhaltende Hochregulation der endogenen CD47-Expression zu bewirken. Die Verwendung von nuklease-inaktivem dCas9 verhindert die Einführung von Doppelstrangbrüchen in der DNA und bewahrt den nativen CD47-Genomlokus sowie die regulatorische Architektur.

Das lentivirale Format bietet mehrere praktische Vorteile: Die stabile genomische Integration unterstützt eine vererbbare Aktivierung über Zellteilungen hinweg; Partikelpräparate mit hohem Titer machen eine eigene Virusproduktion überflüssig; und die Kompatibilität mit primären, sich nicht teilenden und transfektionsresistenten Zelltypen erweitert die experimentellen Möglichkeiten. Eine erfolgreiche Transduktion kann durch eine dreifache Antibiotika-Selektion mit Puromycin, Hygromycin und Blasticidin bestätigt und verstärkt werden.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.