CD47 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421180-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- CD47O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase CD47 (m) e o Plasmídeo Double Nickase CD47 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cd47. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:CD47 Anticorpo (MIAP301): sc-12731
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
CD47 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421180-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
CD47 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421180-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Cd47 codifica o CD47, um recetor da superfamília das imunoglobulinas amplamente expresso que funciona como um sinal de “não me coma” ao ligar-se ao SIRPα em macrófagos, modulando assim a fagocitose e os checkpoints da imunidade inata. O CD47 também interage com a trombospondina-1, influenciando a sinalização de integrinas, a adesão celular, a migração e respostas vasculares dependentes de óxido nítrico. Em tecidos de rato, o CD47 contribui para a depuração homeostática de células, a regulação da sinalização inflamatória e a modulação das interações entre tumor e sistema imunitário. A desregulação da sinalização de CD47 tem sido implicada na evasão imunitária, na inflamação crónica e em alterações da biologia hematopoiética e vascular, tornando-o um nó relevante para estudos mecanísticos das vias de vigilância imunitária.
CD47 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cd47 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cd47. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cd47. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cd47 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.