CD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-419557

概要

Cd4はCD4をコードしており、CD4はI型膜貫通型糖タンパク質である。CD4は主にヘルパーT細胞および一部の胸腺細胞に発現し、MHCクラスIIに対するTCR認識を安定化させる共受容体として機能するとともに、Lck依存的なシグナル伝達を促進する。TCR複合体との会合を介して、CD4は胸腺での選択、T細胞活性化の閾値、ならびにエフェクター系譜および制御性系譜への分化を形作る下流経路に寄与する。CD4依存的シグナル伝達の変調とCD4陽性T細胞の恒常性の破綻は、自己免疫や炎症の状況における免疫調節異常の中核であり、CD4陽性T細胞機能の変化は腫瘍免疫や宿主—病原体相互作用においても重要である。マウスモデルでは、Cd4の攪乱は、生体内外における抗原提示、サイトカイン駆動性の極性化、ならびに獲得免疫ネットワークの挙動を解析するために広く用いられている。

CD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるCd4遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Cd4内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Cd4のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、CD4タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、CD4シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Cd4欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• CD4の機能に不可欠なCd4エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Cd4ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• CD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびCD4 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Cd4遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  CD4 HDRプラスミド（m）および CD4 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはCd4ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のCd4標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。