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CD37 CRISPR Activationプラスミド (m) | sc-419547-ACT | 20 µg | $397.00 |
マウスCd37はCD37をコードしており、CD37はB細胞および他の白血球サブセットに広く発現するテトラスパニンで、膜マイクロドメインを組織化し、受容体介在性シグナル伝達を調節します。CD37は、B細胞受容体シグナルの強度調節、免疫シナプス形成、インテグリン依存的な接着および遊走の制御に関与し、サイトカイン応答やリンパ球活性化に関連する下流経路に影響を与えます。足場(スキャフォールド)としての機能を通じて、CD37は抗原提示やリンパ組織内での細胞間コミュニケーションの制御にも寄与します。CD37の発現やシグナル伝達の異常は、液性免疫機能やリンパ球恒常性の変化と関連づけられており、Cd37は免疫学および血液疾患モデルにおける機序解明研究の有用な標的となります。
CD37 CRISPR活性化プラスミド(m)は、基盤となるDNA配列を変更することなく、内因性Cd37の発現を標的化し、非破壊的にアップレギュレートするアプローチを提供します。
CD37 CRISPR 活性化プラスミド (m) は、ヒト細胞株における Cd37 遺伝子座の高効率かつ部位特異的な転写アップレギュレーションのために設計された、3 つのプラスミドからなる相乗的活性化メディエーター (SAM) システムです。このシステムは、DNA結合能を維持しつつヌクレアーゼ活性を失わせる2つの不活性化変異(D10AおよびN863A)を有する、触媒活性のないCas9(dCas9)を中核としています。このdCas9は、強力な転写活性化因子であるVP64と融合しており、選別用のブラスティシジン耐性遺伝子と共に共発現します。2番目のプラスミドは、dCas9-VP64と協調して機能する二次活性化複合体であるMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードしており、ヒグロマイシン耐性遺伝子と共に発現する。3番目のプラスミドは、標的特異的な20塩基対のsgRNAをコードしており、これはMS2-p65-HSF1複合体を活性化部位に誘導する2つのMS2 RNAアプタマーと融合しており、さらにピューロマイシン耐性遺伝子が付随している。これら3つのプラスミドは、システム構成要素すべてが均等に発現するよう、質量比1:1:1で導入される。
標的遺伝子座に集合すると、SAM複合体はCd37転写開始点の上流約200 bpの領域に結合し、そこでVP64、p65、およびHSF1が協調して転写装置を動員し、内因性CD37の発現上昇を促進する。ヌクレアーゼ活性を持つCas9とは異なり、 dCas9は二本鎖切断を導入したりゲノム配列を改変したりしないため、天然のCd37遺伝子座が保持され、内因性遺伝子座におけるCD37依存性の転写応答の研究が可能となります。これにより、機能解析、標的遺伝子の同定、およびCd37発現が沈黙または低下した腫瘍細胞におけるCD37経路の回復のモデル化を行う上で、貴重なツールとなります。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。