CD362/SDC2/Syndecan-2 Plasmídeo de ativação de CRISPR (h): sc-401392-ACT

O SDC2 codifica a sindecana-2 (CD362), um proteoglicano transmembranar de sulfato de heparano que organiza a matriz pericelular e atua como co-receptor de fatores de crescimento, quimiocinas e ligantes da matriz extracelular. Ao coordenar interações com integrinas, quinases da família Src e a sinalização de GTPases Rho, a sindecana-2 modula a dinâmica das adesões focais, a remodelação do citoesqueleto e a migração celular, com efeitos a jusante em vias como FAK/ERK e Wnt/β-catenina. O SDC2 também contribui para a comunicação célula–célula e para a atividade de proteases por meio do shedding do ectodomínio, influenciando microambientes angiogênicos e inflamatórios. A expressão desregulada de SDC2 tem sido associada à invasão tumoral, à remodelação relacionada à fibrose e a alterações na sinalização do estroma, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de sinalização relevantes para doenças.

CD362/SDC2/Syndecan-2 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) oferece uma abordagem direcionada e não destrutiva para regular positivamente a expressão endógena de SDC2 sem alterar a sequência de ADN subjacente.

CD362/SDC2/Syndecan-2 O Plasmídeo de Ativação CRISPR (h) é um sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) de três plasmídeos, concebido para a regulação positiva transcricional altamente eficiente e específica do locus SDC2 em linhas celulares humanas. O sistema é construído em torno de uma Cas9 cataliticamente inativa (dCas9) portadora de duas mutações inativadoras (D10A e N863A) que eliminam a atividade nuclease, preservando simultaneamente a ligação ao ADN. Esta dCas9 é fundida com VP64, um potente ativador transcricional, e é coexpressa com um gene de resistência à blasticidina para seleção. O segundo plasmídeo codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1, um complexo ativador secundário que atua em conjunto com o dCas9-VP64, juntamente com um gene de resistência à higromicina. O terceiro plasmídeo codifica um sgRNA de 20 nt específico para o alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 que recrutam o complexo MS2-p65-HSF1 para o local de ativação, acompanhado por um gene de resistência à puromicina. Os três plasmídeos são administrados numa proporção de massa de 1:1:1 para uma expressão equilibrada de todos os componentes do sistema.

Uma vez montado no locus alvo, o complexo SAM liga-se a cerca de 200 pb a montante do local de início da transcrição SDC2, onde VP64, p65 e HSF1 atuam em conjunto para recrutar a maquinaria transcricional e impulsionar a regulação positiva da expressão endógena de CD362/SDC2/Syndecan-2. Ao contrário da Cas9 com atividade nuclease, o dCas9 não introduz quebras de cadeia dupla nem modifica a sequência genómica, preservando o locus SDC2 nativo e permitindo o estudo de respostas transcricionais dependentes de CD362/SDC2/Syndecan-2 no locus endógeno, tornando-o uma ferramenta valiosa para estudos funcionais, identificação de genes-alvo e modelagem da restauração da via CD362/SDC2/Syndecan-2 em células tumorais com expressão de SDC2 silenciada ou reduzida.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.