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CD36CRISPR激活质粒(m) | sc-419545-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
CD36CRISPR激活质粒(m2) | sc-419545-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
小鼠 Cd36 基因编码 CD36,这是一种多功能的 B 类清道夫受体,能够结合长链脂肪酸和氧化脂蛋白,从而调控脂质摄取、细胞内脂质处理以及能量代谢。CD36 参与脂肪酸转运、炎症信号传导和巨噬细胞泡沫细胞形成等通路,将营养感知与先天免疫反应联系起来。除在脂肪组织、肌肉和肝脏代谢中发挥作用外,CD36 还可通过与修饰脂质的相互作用影响血管生物学以及氧化应激反应。在小鼠模型中,Cd36 的表达或信号传导失调与心代谢表型、胰岛素抵抗相关过程以及炎症驱动的病理改变有关。
CD36 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Cd36的表达。
CD36 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Cd36基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Cd36转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性CD36表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Cd36位点,并能够研究内源性位点上依赖于CD36的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Cd36表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟CD36通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。