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CD3-ε慢病毒激活颗粒(h) | sc-400240-LAC | 200 µl | $455.00 |
CD3E 编码 CD3-ε,是 T 细胞受体(TCR)-CD3 复合体的关键亚基之一,支持 T 细胞发育、抗原依赖性的 TCR 组装以及质膜处的信号转导。通过相关 CD3 链上的免疫受体酪氨酸基激活基序(ITAM)信号传递,CD3-ε 有助于启动涉及 LCK 和 ZAP70 的激酶级联反应,进而激活 MAPK、NF-κB 和 NFAT 等下游通路,从而调控细胞因子产生与 T 细胞分化。CD3E 的表达或功能异常与胸腺细胞选择缺陷及适应性免疫反应受损相关,因此常在免疫缺陷、免疫失调以及肿瘤免疫学等研究背景中被重点关注。
CD3-ε 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 CD3E 表达。
CD3-ε 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在CD3E转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性CD3-ε表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 CD3E 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。