CD26 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400862-LAC

A DPP4 humana codifica a CD26, uma glicoproteína transmembranar do tipo II com atividade de dipeptidil peptidase que trunca determinadas hormonas incretinas, quimiocinas e neuropéptidos, moldando a sinalização mediada por peptídeos em tecidos imunitários e metabólicos. Para além do seu papel enzimático, a CD26 participa na sinalização coestimuladora em células T e modula interações célula–célula e célula–matriz por meio de parceiros de ligação como a adenosina desaminase e componentes da matriz extracelular. A DPP4/CD26 cruza-se com vias que regulam inflamação, quimiotaxia e homeostase da glicose, e a sua expressão é regulada de forma dinâmica em compartimentos epiteliais, endoteliais e hematopoiéticos. Alterações na atividade da DPP4 ou na expressão da CD26 têm sido associadas a desregulação imunitária, características cardiometabólicas e biologia tumoral, sustentando a sua utilização como um nó mecanístico em estudos centrados em vias.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD26 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de DPP4 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais CD26 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição DPP4, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de CD26. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo DPP4 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.